АмниФлюд (AmniFluid) – это тест, предназначенный для определения подтекания околоплодных вод, методом иммунохроматографического выявления антигена протеина-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста (ПСИФР-1) в околоплодной жидкости беременных женщин с помощью качественной реакции.

Протеин-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста - полипептид 25 кДа, синтезируется и секретируется клетками печени человека и плода, а также децидуальными клетками эндометрия во время беременности.

Аналитическая чувствительность теста составляет 20 нг/мл. Каждый тест снабжен внутренним контролем, в виде контрольной полосы. Чувствительность 95%. Специфичность 94%. Время достижения устойчивых - показателей 15 мин.

Набор реагентов АмниФлюд должен храниться и транспортироваться при температуре от плюс 4 до плюс 25°С, в упаковке предприятия-изготовителя в сухом месте в течение всего срока годности. Замораживание АмниФлюд не допускается. Изделия, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не подлежат

Медицинское изделие РУ 2021/14067 от 20.04.2021

ИНСТРУКЦИЯ по применению «Набора реагентов «АмниФлюд» для иммунохроматографического выявления протеина-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста в околоплодной жидкости»

1. Назначение

Набор реагентов «АмниФлюд» для иммунохроматографического выявления антигена протеина-1, связывающего инсулиноподобный фактор роста (ПСИФР-1) в околоплодной жидкости беременных женщин с помощью качественной реакции иммунохроматографическим методом.

Показания и противопоказания к применению изделия

Набор реагентов «АмниФлюд» предназначен для профессионального использования врачом акушерско-гинекологической практики и служит вспомогательным средством для диагностики подтекания околоплодных вод при разрыве плодных оболочек у беременных женщин и назначения правильного лечения больного.

2. Характеристика Набора

Набор рассчитан на проведение одного анализа по выявлению ПСИФР-1

В состав Набора реагентов входит:
- индивидуальный тест «АмниФлюд» - 1 шт.;
флакон - капельница, содержащий раствор для экстракции – 1 шт.;
стерильный тампонзонд для забора пробы –1 шт.;
наклейка в историю болезни– 1 шт.

Комплект поставки: Набор реагентов – 1шт., инструкция по применению – 1шт., паспорт – 1 шт.

Тестовая подложка с мембраной содержит:
- Конъюгат коллоидного золота и моноклональных антител (0,32±0,04 мкг);
Тестовая полоса: моноклональные антитела к ПСИФР1 (0,47±0,05 мкг);
Контрольная полоса: антитела кролика к иммуноглобулинам мыши (0,71±0,12 мкг).

Преждевременное излитие околоплодных вод является главной непосредственной причиной недоношенности.

Протеин-1, связывающий инсулиноподобный фактор роста - полипептид 25 кДа, синтезируется и секретируется клетками печени человека и плода, а также децидуальными клетками эндометрия во время беременности.

3. Принцип работы Набора

Тестирование проводится иммунохроматографическим методом. Набор представляет собой конструкцию, состоящую из комбинации мышиных моноклональных антител,
кроличьих антител против иммуноглобулинов мыши и пористых материалов.
Исследуемая проба вносится в лунку для внесения образца. Антиген исследуемой пробы взаимодействует с антителами, связанными с коллоидными частицами золота, с образованием устойчивого комплекса. Этот комплекс под воздействием капиллярной силы движется к иммобилизованным на мембране вторым антителам, где и происходит визуализация результата ПСИФР -1 в тестируемых пробах с высокой специфичностью и чувствительностью. Не связавшийся конъюгат, продвигается по мембране образует вторую окрашенную полосу - внутренний контроль теста.

4. Аналитические характеристики

Аналитическая чувствительность составляет 20 нг/мл.
Контроль работы тест:. Каждый тест снабжен внутренним контролем, в виде контрольной полосы.
Чувствительность 95%. Специфичность 94%.
Время достижения устойчивых - показателей 15 мин.

5. Меры предосторожности

5.1.Только для диагностики in vitro и для профессионального использования.
5.2 Потенциальный риск применения Набора — класс 2а
5.3 Все компоненты Набора не токсичны и готовы к использованию.
5.4 Все образцы, взятые на анализ, должны рассматриваться как потенциально опасные. Персонал,
должен располагать средствами защиты, в соответствии с ГОСТ Р ИСО 15190. После тестирования Набор должен быть утилизирован, согласно СанПиН 2.1.7.2790-10

6. Оборудование и материалы

Рекомендуемое оборудование, необходимое для проведения анализа: секундомер

7 Анализируемые образцы

В качестве образца использовать цервикальный или вагинальный секрет беременной женщины. Образцы с присутствием обильных кровянистых выделений (конец тампона красный) использовать не рекомендуется, так как это может привести к ложноположительному результату. Наличие следовых количеств крови в пробе (тампон слабо розовый) не влияет на работу теста.
Пробы необходимо проанализировать не позднее 1 часа после взятия образца или образец следует заморозить и хранить при температуре минус 18°С. Не допускать повторного замораживания.

8. Проведение анализа

Подготовка реагента: Все компоненты Набора готовы к использованию.

8.1 .Извлеките тампон из упаковки непосредственно перед взятием образца. Введите во влагалище на глубину не более 5 – 7 см. Оставьте тампон во влагалище на 10-15 секунд, чтобы он впитал  содержимое, и только после этого выньте его. Тампон должен быть смочен полностью.
8.2 Экстракция образца Открутите колпачок у флакона с раствором, снимите капельницу, поставьте флакон в круглое отверстие в упаковке. Поместите тампон со взятым образцом внутрь флакона. Экстрагируйте пробу, вращая тампон, периодически прижимая его к стенкам и дну флакона в течение 10-15 секунд. Затем прижмите тампон к стенке флакона, выжимая содержимое. После удалите тампон из флакона и утилизируйте его. Закройте флакон вставкой - капельницей.
8.3 Внесение образца в иммунологическую планшету:
Извлечь иммунологическую планшету из индивидуальной упаковки и промаркировать планшету.
Внести подготовленный по п 8.2. образец из флакона–капельницы в овальное окно тестовой планшеты. Объем вносимой пробы должен составлять 0,1-0,11 мл (2 капли). Включить секундомер.
Регистрация результатов осуществляется визуально.
Оценка результатов проводится в течение 15 минут после внесения образца. Результат после 20 минут считать недействительным.

9. Регистрация результатов

Регистрация результатов осуществляется визуально. Оценка результатов проводится в течение 15 минут после внесения образца. Результат после 20 минут считать недействительным.
а) Положительный результат
б) Отрицательный результат
в) Недостоверный результат

Положительный. Выявление двух полос свидетельствует о положительном результате (рис. 1а). При большой концентрации антигена, положительный результат может появиться в первые минуты после внесения образца. Чем ниже концентрация антигена, тем больше времени необходимо для того,
чтобы появилась тестовая полоса.

Отрицательный. Выявление одной контрольной линии в течение 15 минут свидетельствует об отсутствии околоплодных вод в содержимом (рис. 1б).

Недостоверный. Полное отсутствие окрашивания на обоих участках или наличие окрашенной полосы только на тестовом участке является признаком ошибки в процедуре тестирования и/или порчи реагента. Выполнить анализ еще раз с использованием новой тест-системы (рис. 1в)

10. Документирование и архивирование

Для документации результатов теста ставится отметка о полученном результате тестирования в наклейку в историю болезни. Полностью заполненную наклейку внести в медицинскую карту пациента

11. Ограничения

Для правильности работы тест-системы следует неукоснительно соблюдать все положения данной инструкции.
Тест дает качественные результаты и показывает повышенный уровень ПСИФР-1 в образце, что не должно рассматриваться как единственный критерий для диагностики подтекания околоплодных вод. Так же, как и при любом другом диагностическом исследовании, результат тестирования должен быть интерпретирован вместе с клиническими данными.
Не применять для диагностики, если повреждение плодных оболочек произошло более чем за 12 часов до забора пробы, возможен отрицательный результат из-за распада ПСИФР-1 под действием протеаз, обычно присутствующих во влагалище. Целесообразно в таких случаях периодическое повторение теста.
Присутствие следовых количеств крови с малой вероятностью может повлиять на результат теста. Большое количество крови в пробе может привести к ложноположительному результату .
Из-за слишком большой нагрузки на ткани пузыря при крупных размерах двух плодов и более возможны небольшие протекания околоплодной жидкости.

Интерференции

Используемые в тест-системе антитела не проявляют кросс-реактивности с инсулином и проинсулином человека.
Вагинальные инфекции, примесь мочи, семенной жидкости в образцах, не влияет на результаты теста. У пациенток, неоднократно рожавших, повышение маркера ПСИФР-1, не происходит при нормально протекающей беременности

Таблица 1 - Ошибки при проведении анализа и способы их исключения

Описание ошибки:
Нет ни одной полосы

Причина:
1.Недостаточное внесение материала
2.Внесение большого избытка материала
3. Неправильное хранение теста; нарушения условий хранения, долгое хранение во вскрытом состоянии

Методы устранения:
1. Взять следующую пробу не менее 0,15 мл (3 капли) и внести в новый тест.
2. Взять следующую пробу не более 0,15 мл (3 капли) и внести в новый тест.
3. Взять новый тест

12. Условия хранения и эксплуатации Набора

«Набор реагентов «АмниФлюд»» должен храниться и транспортироваться при температуре от плюс 4 до плюс 25°С, в упаковке предприятия-изготовителя в сухом месте в течение всего срока годности. Замораживание «Набора реагентов «АмниФлюд»» не допускается. Изделия, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не подлежат.

Срок годности Набора: 12 месяцев.

Один Набор реагентов «АмниФлюд» предназначен для проведения одного определения ПСИФР-1.
После вскрытия первичной упаковки Набор реагентов «АмниФлюд»» должен быть использован в течение 15 мин и в это время храниться в сухом месте при комнатной температуре (от плюс 20°C до плюс 25°C). В случае порчи индивидуальной упаковки не используйте Набор реагентов, так
как повреждение упаковки может оказать влияние на рабочие характеристики продукта. Стерильный тампон-зонд извлекается из упаковки непосредственно перед взятием образца.

Гарантийные обязательства

Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возникших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функциональные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют нормативной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого дефекта материалов или
некачественного изготовления изделия производителем.
По вопросам, касающимся качества Набора реагентов «АмниФлюд» должен следует обращаться в ООО НПО «БиоТест» по адресу: 630090, г. Новосибирск, ул. Кутателадзе, 4а-101, тел./факс +7 (383)